在书报上所载关于咖啡碱作用的观点，也存在着很多分歧，曾经用犬、猫、豚鼠、鸟等作试验，用大量的药剂注射，而得到不同的结果。这种工作的困难在于还有很多未被利用的材料必须加以研究，得出平均测量结果，才不致于产生其它的副作用。
在测试咖啡碱对于低级动物的作用时，发现植物碱能使脉搏加快、加强心脏的收缩及刺激血管运动中枢。但是在以人类为试验时结果并未像上述那样详尽，其原因之一是对于畜类的药量比较大，如伍德研究少量药剂对人体的影响，他用6格令(1格令等于0.0648克)的药量不能察觉对血压有如何明显的升高。一些研究者测试血液循环与人类相似的犬，发现狗的血压受咖啡碱的影响而增高很多，伍德的下列的事实说明中间差异之处:以犬作试验时，为体重1公斤施药量100毫克，即相当于600毫克的药量施加于普通体重的人，如果用少量的药剂施加在犬身上(每公斤1毫克)时，犬的脉搏次数并不增加伍德用治疗用的药量(约18-36毫克)施于人时，发现只略微增加心脏的收缩力，而使动脉的血压略有升高。
咖碱对于肌肉收缩力的影响，曾有人加以研究，1892年德·罗及伯纳迪尼用验力器测明咖啡碱能增加肌肉的收缩力。其他一些研究者多数采用肌力计的方法，也能测出咖啡碱的刺激效力，其结果大半被里弗斯及韦伯所证实，他们也断定肌肉工作的增加并不是由于任何兴趣及心理暗示造成的。伍德只以治疗药量研究咖啡碱对于肌肉的运动的影响，他认为咖啡碱对于脊髓的反射中枢有兴奋作用，使肌肉的收缩更有力而不发生间接的衰退。所有研究的结论说明，吸食咖啡碱后的肌肉工作能力更大。
大量服用咖啡碱会引起肌肉僵硬，但是一般人的摄取量不会导致这种现象发生。
咖啡碱对于精神的形响也是历来研究的对象。克拉普林说“我们已经知道茶与咖啡能增加我们的精神效能到一定的程度，因此可利用这些饮料作为克服精神疲劳的方法。在早晨，这种饮料可以除去精神疲劳上的最后的痕迹，到了晚上，当我们处理心智上的工作时，它又能使我们保持清醒的状态。”韦德梅耶尔认为正常服用咖啡碱，在心理上的影响从四五个星期以后开始降低。
咖啡碱与人体全部系统。
除上述的特别研究外，H.L.霍灵沃斯在组约哥伦比亚大学曾进行了咖啡碱对于人体各系统的普通测试，他竭力除去这些试验常有的错误，其结果是根据无数次的测量而得(见下表)，所测试的项目包括稳定、轻叩、同等打字、辨色、计算、反面、取消及辨别等试验，再加以近似形量的幻觉测试。
上述试验是在一个装有特殊设备的实验室中进行的，如果要了解试验技术的详细情况，可参考心理学丛书(心理学档案》中ー篇专门论文，题为(哥伦比亚对于哲学及心理学的贡献》。
咖啡碱放在胶囊及糖浆内，将胶囊与糖浆在试验者不知情的情况下服用。
简单来说，此项试验目的如下:
(一)在控制的情况下，研究若干个人在长时间40日一一内的动作，以决定咖啡碱无论在定性及定量方面对心智及运动过程的影响。
(二)研究由于被测试者的性别、体重、年龄及癖好而改变这些影响的方法，用药量的多少及用药时间与情况不同而受影响程度。
(三)研究咖啡碱对于受试者一般的健康、睡眼的量及饮食习惯的影响。研究结果见上表。
应用的药量由6毫克至36毫克，24毫克以上即为大量。在各种试验中均无反应。一般的结论为咖啡碱对于运动过程的影响迅速明显，但短暂;对于心智的影响过程则迟缓而长久。有两个重要的因素能改变咖啡碱的影响过程，即体重及服用咖啡碱时留在胃中的食物。在各种试验中改变咖啡碱的影响程度恰好与体重成反比，尤其是在空腹摄取时更加明显，这种变化对于睡眠的质量也是如此，如果连续数日摄取则更加明显。咖啡碱的效用似乎不受年龄、性别及固有的咖啡碱癖的影响。在试验时不用含有咖啡碱的饮料，被测试者也没有需要这种饮料的表示。由于缺乏对许多重要的指标的跟踪，不能确切证明它对工作能力的提高的作用，但事实上个人的工作水平却因此提高。由这个试验证明，饮用含适量咖啡碱的饮料不会造成身体不适。
咖啡碱由体内的排出
关于咖啡碱由体内排出的问题，萨兰特及瑞格从兔、豚鼠、猫及犬身上研究的结果，发现一部分是由于服食的情形，一部分无变化由尿中排出，一部分则进入胃肠管及胆汁。其结果是咖啡碱的重甲基置换，在食肉动物中比食草动物中多，因此食肉动物利用这种作用以防御这种药的毒性，这是因为咖啡碱对于食肉动物的毒害要大于食草动物。
咖啡碱，尿酸及嘌呤属的其他部分各部在构造上的关系，已在上章中提到，可以知道咖啡碱受重甲基的置换(移去CH根)及氧化作用(以氧代替氢)后可变成尿酸。
动物服食咖啡碱后，从尿中排出少量(少于服食量的1/10)罗斯特认为人类在尿中排出的咖啡碱，仅约为2％。
曼德尔及沃德尔的报告中认为在不含嘌呤的食物中添加茶、咖啡或咖啡碱后，咖啡碱的排泄量的增加与服食的咖啡碱成正比。但克拉克及罗里默在最近的报告中反对这种说法，他们的试验的对象是加利福尼亚昆丁悔过所中的拘留者，服食咖啡碱后虽能增加这种物质在尿中的排出量，但二人却不能查出这两种含量间的必然关系。服食咖啡碱后尿中排出的尿酸增加，但他们不认为这些增加的尿酸是由于咖啡碱受重甲基置换及氧化作用所致;他们还发现服食咖啡碱后能增加血液中的尿酸浓度。
上述各研究者也认为由于服食药物是由口腔进入，因此极难说明是否有些被人体组织所吸收，这根据具体情况而定，如剩余食物的分量、细菌活动情况、蠕动率等。
K.奥库西玛认为饮茶或咖啡一小时后，尿中排泄的咖啡碱开始增加，在3一4小时后达到最高点，以后逐渐降低，但可持续4-5小时之久。
这些关于咖啡碱排泄的研究，并不包括从汗及肠道的排出，关于整个问题，在下任何重要结论之前，需要进一步的研究。
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