吡虫啉是一种新型的硝基亚甲基类的高效内吸性广谱而且残效期长的杀虫剂，具有胃毒和触杀作用，其有效成分为1-（6-氯吡啶-3-吡啶基甲基）-N-硝基亚咪唑垸-2-基胺，分子式为C9H10CIN5O2。其杀虫机制主要是选择性抑制昆虫神经系统烟酸乙酰胆碱酯酶受体，从而阻断昆虫中枢神经系统的正常传导，造成害虫出现麻痹进而死亡。近年来吡虫啉被广泛用于茶叶生产上，主要用于防治茶小绿叶蝉，目前日本肯定列表中吡虫啉MRL定为100mg/kg，欧盟EC149/2008中的MRL为0.05mg/kg， 韩国等也对茶叶中吡虫啉残留提出检测要求。检验方法简介。

1材料与方法

1.1仪器与试剂1.1.1仪器

Agilent 7890A-5975C气相色谱-质谱（GC-MS） 联用仪，美国安捷伦公司；CS501旋转蒸发仪，上海瑞立科学仪器有限公司；IKA T10均质机，德国IKA公司；VM06型6位大体积负压SPE 装置，天津Agela公司。

1.1.2试剂

正己垸、丙酮、乙酸乙酯为分析纯，杭州化学试剂有限公司；乙腈为色谱纯，天津市四友医学生物有限公司；6ML TPT相萃取柱，天津Agela公司；吡虫啉标准品（纯度≥95%），德国Dr.Ehrenstorfer

1.1.3茶叶样品

国家茶叶质量监督检验中心提供。

1.1.4标准溶液配置

准确称取吡虫啉标准品，用乙腈超声溶解，配成100ug/ml的标准母液，使用时将标准储备液稀释成不同浓度的标准溶液。

1.2样品前处理

1.2.1样品制备

按GB/T 8303-2002制备试样。

1.2.2提取和净化

茶叶中含有大量的叶绿素、茶红素、茶黄素、胡萝卜素、茶多酚和其他大量不确定的干扰物，虽然采用乙腈提取可以选择性地除去一部分茶叶基质，但是还需做进一步的净化处理以除去剩余的色素和其他小分子杂质。活性炭小柱能很好地吸附色素，氨基柱能有效地吸附有机酸和糖分，将这两种小柱串联在一起净化效果较好。因此，本实验选用乙腈作为提取剂，进行实验。

（1）提取。称取2.00g粉碎好的茶叶于10ml离心管中，加人乙腈6ml，15000r/min均质提取1min,4000r/min离心5min，取上清液于200ml平底烧瓶中。残渣用乙腈重复提取一次，离心，合并二次提取液，40℃浴旋转蒸发至1ml左右，待净化。

〈2）SPE净化

1）活化。将5ML乙腈/丙酮/乙酸乙酯=3：2：1 的混合液以每秒1滴的速度通过TPT固相萃取柱，并保持柱子湿润。

2）洗脱。将浓缩液用洗脱液洗入固相萃取柱，以每秒1滴的速度通过小柱，并收集于100ml圆底烧瓶中；再用20ML混合洗脱液（乙腈/丙酮/ 乙酸乙酯=3:2:1）分4次洗脱固相萃取小柱，合并收集于20ML圆底烧瓶中。

3）定容。40℃下减压浓缩至1ML，吹干，用正己垸定容至5ML，供GC-MS检测。

1.2测定条件

色谱柱：DB-1701石英毛细管柱（30M*0.25MM*0.25UM）载气：氦气HE,纯度≥99.999%。，流速1.2ML/MIN；进样口温度290℃；进样量1ul，非分流进样；色谱柱升温程序：70℃保持1min，然后以20℃/min℃程序升温至280℃ ，再以5℃/min升温至290℃，保持110min，再以10℃/min 升温至300℃，保持5min；电离方式为电子轰击电离源（EI）70eV接口温度280℃；四级杆温度150℃，离子源温度230℃；溶剂延迟7min。

1.3标准曲线

将吡虫啉标准母液用正己烷稀释成0.02-8.0mg/kg,，在上述仪器条件下，将1ul不同浓度标准溶液进人气相色谱仪，测定gc/ms对吡虫啉响应的线性关系。

1.4方法回收率

在农残检测中通常以在空白样品中添加一定浓度的标准溶液，然后检测其添加回收率，来衡量检测方法的可靠性气在本试验中，以茶叶样品中含吡虫啉0.08-1.60mg/kg的添加量在空白样品中添加标准溶液，再按前述的样品处理方法处理，检测样品中吡虫啉的实际浓度，并计算添加回收率。

1.5定性和定量方法

选择吡虫啉质量数较大、相对丰度较大的碎片离子作为定量离子，依此原则再选择1-3个碎片离子作为定性离子，以定量离子和定性离子共流出与否以及丰度比来判断样品是否含有目标化合物，由定量离子积分来定量。

2 结果与讨论